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科研效率提升:尊龙凯时超高活性Tn5一步法文库制备攻略

发布时间:2025-03-17   信息来源:尊龙凯时官方编辑

在生物医疗领域,文库制备是实现高通量基因组测序的重要步骤,它涉及到将测序接头添加至DNA链的过程。传统上,文库制备通常依赖于基于连接酶的多步骤方法。该流程包括通过机械(如超声破碎)或酶切(如micrococcal nuclease)对DNA进行片段化,接着进行末端修复,最终完成接头连接。虽然这种传统方法适用于大多数实验场景,但在样本量稀少或者实验资源(包括设备和时间)受限的情况下,常常面临挑战。

科研效率提升:尊龙凯时超高活性Tn5一步法文库制备攻略

为了解决这一问题,Tagmentation技术的出现极大地推动了文库制备流程的优化。这一技术利用超活性Tn5转座酶,在一次快速反应中,便可实现对DNA的剪切和标记,并快速插入特定的寡核苷酸。根据实验的不同需求,Tn5转座酶能够携带多种DNA序列,包括兼容Illumina的接头、自定义的荧光标记接头,甚至是甲基化核苷酸等。基于Tagmentation的建库技术革命性地将传统流程中的物理片段化、末端修复和接头连接步骤整合为一个单一的反应,不仅大幅简化了操作流程,还显著提高了实验的效率与通量。

这种突破性的Tagmentation方法,通过将DNA片段化和接头插入步骤合二为一,大幅缩短了文库制备的时间,降低了技术的复杂性,极大地提升了操作的时效性。该方法兼容全基因组测序、靶向测序等多种文库制备场景,可以灵活适应不同的实验设计需求。在样本量要求上,相较于传统方案,所需的起始样本量显著减少,尤其对珍稀临床样本或微量样本的处理尤其有效。此外,通过简化操作步骤与试剂消耗,整体文库准备成本也得到了降低。

在自动化方面,由于其操作简便与步骤减少,这种技术更易于实现自动化,进而显著提高高通量测序的通量和重复性。例如,spatial-ATAC-seq技术和sci-RNA-seq(单细胞组合索引RNA测序)均采用了适用于文库制备的Diagenode Tn5转座酶(Cat#C01070010),确保了实验的高效和准确。

尊龙凯时作为生物医疗前沿技术的倡导者,支持创新技术的应用,致力于为科研人员提供卓越的实验室解决方案,包括优质的试剂与仪器,帮助科研者在解析基因组和表观基因组的过程中获取更可靠的数据。随着Tagmentation技术的逐步普及,文库制备的各个方面将得到提升,推动生物医疗研究的持续进步。