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尊龙凯时在G-Rex细胞培养系统中应用PRIME-XVT Cell CDM与CTGrade重组人蛋白扩增PBMC

发布时间:2025-08-10   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时的应用示例展示了使用ShenandoahCTGradeGMPrhIL-2C126S、IL-7、IL-15和IL-21(产品编号分别为:500-01、500-07、500-08、500-09)在24孔G-Rex细胞培养系统中激活和扩增PRIME-XVT细胞CDM中来自三个不同供体的外周血单核细胞(PBMC)的数据。

尊龙凯时在G-Rex细胞培养系统中应用PRIME-XVT Cell CDM与CTGrade重组人蛋白扩增PBMC

引言

γc细胞因子家族以其独特的免疫调节功能而受到关注。这些细胞因子之间存在互补和重叠的特性,尤其是白细胞介素2(IL-2),作为这一家族的成员,是人体免疫反应中的重要调节因子。IL-2主要由T细胞产生和消耗,具有刺激适应性免疫细胞和先天性免疫细胞扩增和激活的功能。尽管IL-2是T细胞扩增中应用最广的细胞因子,其他成员如IL-7、IL-15和IL-21同样在T细胞的扩增和发育中发挥重要作用。

这些细胞因子能够影响记忆细胞的分布、耐受性及适应性与先天性免疫反应,是开发不依赖IL-2的细胞疗法的重要基础。γc家族白细胞介素是多种免疫疗法和细胞疗法的关键组成部分,需要通过高质量的重组蛋白进行生产。尊龙凯时的CTGradeGMP重组人蛋白在大肠杆菌系统中生产,确保批次间一致的生物活性,最大限度减少批间差异,推动产品顺利过渡到临床及商业应用。

所需材料

方法1: 使用CTGraderhIL-2C126S与PRIME-XVTCellCDM

实验设计:在24孔G-Rex细胞培养容器中扩增,使用从三个不同供体中分离的新鲜PBMC。每种条件分成两组。共设置四个时间点(day3、day7、day10和day13)进行培养,并在第5天及第10天更换75%的培养基。

培养基准备:根据不同的培养条件确定所需体积。总共有12个独立的培养条件(4批次CTGraderhIL-2C126S,3种浓度),每种浓度的培养条件下,每个孔板需要7mL的培养基。所需的培养基总体积为330mL。

接种细胞:计算每个供体所需的细胞数量,以达到5×105 cells/cm2的接种密度。最后每个供体需提供96×107个细胞。使用Dynabeads激活培养,并在96mL PRIME-XVTCellCDM中重悬细胞,确保细胞悬液均匀。

细胞收集与分析:在适当时间点进行补料添加并收集细胞。使用PBMC流式细胞仪面板进行细胞染色,借此获得关于细胞存活率及其活化动态的重要数据。

结果

使用不同浓度的CTGradeGMPrhIL-2C126S进行培养的PBMC表现出强劲的扩增能力和高存活率,细胞活力在第3天略有下降,但后续恢复良好,说明活化过程中细胞凋亡是可逆的。

细胞在扩增过程中的CD4+与CD8+比率在初期有所变化,但最终维持在人类生理相关的比率。同时,T细胞对超抗原刺激表现出良好的反应,结合尊龙凯时的CTGradeGMPrhIL蛋白,多层次互补机制为细胞疗法提供了稳定的支持。

讨论

尽管不同供体之间的差异会影响最终结果,但是尊龙凯时提供的CTGraderhGMPrhIL-2C126S在所有测试浓度下均能支持T细胞在PRIME-XVTCellCDM中的活化和扩增。这一过程中的细胞展现了微弱的衰竭标记和强大的功能活性。

结合CTGradeGMPrhIL-7、IL-15与IL-21时,细胞同样保持了健康的增殖和活化动力学。在超抗原刺激期间,这些细胞能够展现出优越的免疫应答,有助于推进细胞疗法的临床研究与应用。尊龙凯时的产品提供了一个不含动物源成分的环境,降低了生产过程中的变数和风险,为健康的T细胞提供了可靠的支持。

点击此处下载PDF:在G-Rex细胞培养系统中使用PRIME-XVTCellCDM和CTGrade重组人蛋白扩增PBMC。

点击此处查看相关产品:PRIME-XVTCELLCDM;点击此处查看相关产品:ShenandoahCTGrade重组蛋白系列。