人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)的ELISA试剂盒,专为科学研究设计,严禁用于医学诊断检测。本试剂盒运用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA),通过将样品、标准品以及HRP标记的检测抗体依次加入到预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,经过温育及彻底清洗后,使用底物TMB显色。在过氧化物酶的催化作用下,TMB由蓝色转变为最终的黄色,其颜色深浅与样品中的adropin(AD)浓度成正相关。利用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),进而计算样品浓度。
试剂盒组成
试剂盒包括以下组件:
- 微孔酶标板:96孔配置和48孔配置
- 标准品:03mL*6管
- 样本稀释液:6mL
- 检测抗体-HRP:10mL
- 20×洗涤缓冲液:25mL
- 底物A和B:各6mL
- 终止液:6mL
- 封板膜:2张
- 说明书:1份
- 自封袋:1个
标准品浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。试剂盒应在2-8℃保存,有效期为6个月。
样品收集与处理
为确保实验结果的准确性,请遵循以下样品收集与处理方法:
- 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免细胞刺激,采血后3000转/分钟离心10分钟迅速分离血清与红细胞。
- 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转/分钟离心30分钟取上清。
- 细胞上清液:3000转/分钟离心10分钟去除颗粒与聚合物。
- 组织匀浆:组织与生理盐水进行匀浆,3000转/分钟离心10分钟取上清。
- 保存:若未能及时检测,按单次用量分装并冻存于-20℃,避免重复冻融。
自备物品
实验需准备以下设备:
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头(范围从05-10uL到200-1000uL)
- 37℃恒温箱
操作注意事项
在进行实验时,请务必遵循以下注意事项:
- 取出试剂盒后,需在室温下平衡15-30分钟后使用,未用完的酶标板应存放于密封袋中。
- 洗涤液如有结晶析出,可加热水中帮助溶解,洗涤时不影响结果。
- 加样过程中使用加样器,并定期校验其准确性,建议在5分钟内完成一次加样。
- 同时进行标准曲线的测定,待测物质过高需先稀释样品。
- 封板膜仅供一次性使用以防交叉污染。
- 严格按照说明书操作,试验证果需以酶标仪读数为准。
- 底物应避光保存,所有样品及废弃物应按生物安全处理。
特别提示:购买尊龙凯时的ELISA试剂盒可享受免费的代测服务,更多详情请联系销售经理或在线客服。